Toxoplasma gondii en la industria de elaboración de productos curados. Evaluación de métodos de detección y su aplicación al proceso de evaluación y control del riesgo

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Frecuencia serológica y factores de riesgo asociados a Toxoplasma Gondii en gatos, de consultorios de la ciudad de Lima

Determina la frecuencia serológica y factores de riesgo de Toxoplasma gondii en gatos, de 7 consultorios de la ciudad de Lima. Para ello, se identificó el número de animales seroreactores a IgG e IgM, como la asociación de los factores epidemiológicos (sexo, edad, alimentación y hábitat). Para el estudio, se analizaron las muestras de sueros de 303 gatos de ambos sexos cuyas edades estuvieron comprendidas desde los 2 meses a más, que fueron obtenidas de siete consultorios veterinarios, ubicados en los distritos de Villa María del Triunfo, Santiago de Surco, Lurín, Surquillo, Chorrillos, El Agustino y San Juan de Luringancho. Se halló una seroprevalencia de 7.3 % (IC95% 4.6% - 10.8%) para T. gondii haciendo uso de la prueba de Hemaglutinación indirecta (HAI) con una sensibilidad de 81.6 % y una especificidad de 97.1%. De estas 22 muestras seropositivas, todas correspondía a infección crónica (IgG). Se usó la prueba de chicuadrado donde se demostró que los animales con anticuerpos anti-T. gondii estaban relacionados positivamente con el tipo de hábitat y el tipo de alimentación. En el análisis de regresión bivariado se encontró que la seroprevalencia de T. gondii en gatos que se alimentan de comida casera es 20.59 (p=0.003, IC95% 2.80 - 151.13) veces la seroprevalencia de T. gondii en gatos que se alimentan con comida balanceada; y que la seroprevalencia de T. gondii en gatos que pasan más tiempo fuera de casa es 8.59 (p=0.003, IC95% 2.04 - 36.10) veces la seroprevalencia de T. gondii en gatos que pasan más tiempo dentro de casa. Estos hallazgos confirman una moderada seroprevalencia de T. gondii en gatos de los distritos mencionados

Toxoplasmosis como agente causal de abortos en alpacas

El estudio tuvo como objetivos: determinar la asociación de T. gondii con abortos en el primer, segundo y tercer trimestre de gestación; así como la asociación de T. gondii con mortalidad perinatal. Se realizó un estudio prospectivo de 108 alpacas hembras del Centro de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos - Lachocc de la Universidad Nacional de Huancavelica, localizado a una altura promedio de 4,450 m.s.n.m., durante una campaña reproductiva-enero de 1999 hasta marzo de 2000-a través del monitoreo de anticuerpos de Toxoplasma gondii mediante la Técnica de Hemoaglutinación Indirecta (HAI). De las 332 muestras de suero de alpacas hembras, inicialmente analizadas, se obtuvo una seroprevalencia de T. gondii de 36.45% (121/332) y con las 108 alpacas hembras seronegativas se siguió su seroconversión durante toda la campaña reproductiva; obteniéndose una incidencia acumulada de T. gondii de 25.00% (27/108) a los 270 días después del empadre. La tasa de fertilidad total fue 70.37% (76/108); y de ella, estuvieron infectadas por T. gondii el 27.63% (21/76) mientras que el 72.36% (55/76) no presentaron seroconversión. A la prueba de X2, no existió diferencia significativa (p>0.05), estimando que la fertilidad fue independiente de la infección por T. gondii. Las tasas de aborto para los periodos de 90 a 180 y 181 a 270 y 271 a 330 días, fueron de 9.52% (2/21), 15.79% (3/19) y 12.50% (2/16) para infectadas por T. gondii; mientras que las seronegativas fueron de 5.45% (3/55), 1.92% (1/52) y 5.88% (3/51). La mortalidad perinatal fue 21.43% (3/14) para las infectadas por T. gondii y 4.17% (2/48) en las no infectadas.The objective of the present study was to determine the relationship between T. gondii with the occurrence of abortions en the first, second and third trimester of gestation, as well as the association with perinatal mortality. It was conducted a prospective study using 108 female alpacas at the Centro de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos-Lachocc, Universidad Nacional de Huancavelica, located at 4,450 m.a.s.l., from January 1999 till March 2000, through the monitoring of antibodies against Toxoplasma gondii using the Indirect Haemagglutination Test (IHA). The initial seroprevalence of T. gondii was 36.5% (121/332). The follow-up of the 108 seronegative animals to evaluate serconversion resulted in an accumulate incidence of 25% (27/108) at 270 days after breeding. Fertility rate was 70.4% (76/108), and among them, 27.6% (21/76) were infected by T. gondii whereas 72.4% did not seroconverted. There was no statistical differences (p>0.05) using the X2 test, showing that fertility was independently of infection by T. gondii. Abortion rates for the periods 90-80, 181-270, and 271-330 days were 9.5% (2/21), 15.8% (3/19) and 12.5% (2/16).Tesi

Determinación de las fases de desarrollo intestinal de Toxoplasma gondii (A –E) por medio de la impronta de mucosa intestinal y corte histológico post necropsia así como de oocistos a través de enema salino in vivo en felinos procedentes del mercado Colón de la Ciudad de Guatemala

Capturé, anestesié y practiqué necropsia a tres gatos y siete gatas con una edad promedio en años de 3.5 para los machos y 3.21 para las hembras. De los cuales los tres machos y cinco hembras resultaron positivos a las tres técnicas diagnósticas comparadas. Detecté la presencia del Toxoplama gondii en un 80% de los gatos muestreados. A través de la técnica de impronta de mucosa intestinal identifiqué la fase asexual A. En cortes histológicos de intestino, identifiqué las fases asexuales C, D y E en un 80%. Y para la técnica de enema salino in vivo, observé oocistos en un 80% de los gatos capturados. Con ello se confirma la elevada presencia del Toxoplasma gondii (80%) en gatos que deambulan en el mercado Colón de la ciudad capital de Guatemala

Determinación de IgG-IgM en el diagnóstico para toxoplasma gondi en mujeres embarazadas que son atendidas en Clínica Santa Cecilia Machala. 2013

pdfToxoplasmosis es causado por un protozoo intracelular conocido como toxoplasma gondii, se considera de mucha importancia dentro de Machala, el desconocimiento de la gran magnitud de la toxoplasmosis en mujeres embarazadas en el primer trimestre de gestación, es el principal causante de mortalidad o de severos cuadros clínicos para el nuevo ser vivo, ya que usualmente es asintomático, la realización de un pesquisaje serológico de los anticuerpos IgG–IgM en las mujeres embarazadas constituye la única forma de detectar aquellas, este estudio permitirá hacer énfasis para diagnosticar a este parasito en el primer trimestre de embarazo, para evitar enfermedades al feto o nacidos en término vivo, aunque la infección puede ocurrir en cualquier trimestre del embarazo, es muy importante detectar en el primer trimestre del embarazo evitando trastornos del sistema nervioso central( hidrocéfala interna, convulsiones) y retinocoroiditis. Estudios realizados se determinó 18proteínas, la actina, la catalasa, GAPDH (Gliceraldehído-3- fosfato deshidrogenasa), y tres proteínas hipotéticastenía una amplia reactividad con Toxoplasma sueros positivos, lo que indica su potencial como marcadores de diagnóstico de toxoplasmosis, pauta primordial para la determinación de toxoplasma gondii. El método clínico que se utilizó para este estudio fue por electroquimiolumisencia de alta sensibilidad para el diagnóstico de los anticuerpos IgG- IgM, los resultados obtenidos de la prevalencia de anticuerpos IgG contra T. gondii en embarazadas que asisten a la Clínica “Santa Cecilia” fue de 16% IgG-IgM seropositivo para anti T. gondii, en relación de las mujeres embarazadas con serología positiva para T. gondii decreció linealmente con la edad de la paciente, siendo el grupo de 20-25años el más afectado 40(12%) para IgG positivo y IgM 25(10%) dando como referencia sobre la prevalencia del Toxoplasma gondii. Toxoplasmosis is caused by an intracellular protozoan known as Toxoplasma gondii , is considered of great importance in Machala , ignorance of the magnitude of toxoplasmosis in pregnant women in the first trimester of pregnancy , is the main cause of mortality or severe box clinicians to the new living and that is usually asymptomatic , performing a serological screening IgG -IgM antibodies in pregnant women is the only way to detect those , this study will emphasize to diagnose this parasite in the first quarter pregnancy , to prevent disease to the fetus or term born alive, although infection can occur in any trimester of pregnancy, it is important to detect in the first trimester of pregnancy by preventing central nervous system disorders ( internal hydrocephalus , seizures) and retinochoroiditis . Studies determined 18proteínas , actin , catalase , GAPDH ( glyceraldehyde-3- phosphate dehydrogenase ), and three proteins hipotéticastenía Toxoplasma extensive reactivity with positive serum , indicating their potential as diagnostic markers of toxoplasmosis, primordial pattern for determination of toxoplasma gondii , the clinical method was used for this study was b y electroquimiolumisencia high sensitivity for the diagnosis of IgG -IgM antibodies , the results of the prevalence of IgG antibodies against T. gondii in pregnant women attending the Clinic Santa Cecilia was 16 % IgG anti - IgM seropositive for T. gondii in relation to pregnant women with positive serology for T. gondii decreased linearly with the age of the patient, with the group of 20 - 25years the most affected 40 (12 %) for IgG and IgM positive 25 ( 10% ) taking as reference the prevalence of Toxoplasma gondii

Evaluación y control del riesgo de Toxoplasma gondii en el proceso integral de elaboración del jamón curado

Toxoplasma gondii es un protozoo de distribución mundial, que afecta a los félidos como hospedadores definitivos, y a los animales de sangre caliente, incluído el hombre, como hospedadores intermediarios. Se estima que entre el 25 % - 40 % de la población humana está infectada. La toxoplasmosis, normalmente cursa de forma leve o asintomática, pero en personas inmunocomprometidas y en mujeres embarazadas puede llegar a producir una enfermedad severa.Dado su carácter omnívoro, los cerdos tienen una gran posibilidad de infectarse con T. gondii. Además, los quistes del parásito que se forman en sus tejidos pueden persistir durante varios años, siendo el consumo de carne cruda, poco cocinada o curada de esta especie una de las fuentes más importantes de infección en el hombre.España es un país con una gran tradición en la elaboración y consumo de productos cárnicos curados. De los elaborados con carne de cerdo, el jamón curado es uno de los productos más representativo de la gastronomía española, siendo nuestro país el primer productor mundial de jamones y paletas. Por ello, los consumidores demandan jamones curados libres de T. gondii y esto ha llevado a las empresas del sector cárnico a la necesidad de obtener datos científicos sobre el efecto de los tratamientos tecnológicos que aplican en la viabilidad del parásito, y así, poder garantizar la seguridad alimentaria.Por todo ello, los objetivos de esta Tesis Doctoral se han centrado en el estudio de T. gondii en el proceso integral de elaboración del jamón curado; en la producción primaria, en el matadero y en la industria de elaboración del jamón curado.Se ha realizado un estudio de la seroprevalencia porcina en 161 granjas de la Comunidad Autónoma de Aragón. El número de muestras analizadas se ha calculado estadísticamente para conseguir datos representativos del total de los animales. Se han analizado 1.200 sueros porcinos mediante la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), calculándose una seroprevalencia de T. gondii en cerdo del 24,5 %.Asimismo, se han estudiado los principales factores de riesgo presentes en las granjas que favorecen el contacto de los cerdos con T. gondii. Para ello se han realizado encuestas epidemiológicas en todas las instalaciones incluidas en el trabajo, así como visitas a las explotaciones para ver su estado. Tras su análisis estadístico se ha comprobado que los factores que tiene influencia en la infección son la presencia de gatos dentro o fuera de las granjas, la presencia de otros animales como perros en el exterior de las instalaciones, el censo porcino, el incorrecto mantenimiento y el desorden de las instalaciones, y el no usar cebos para el control de roedores.Del total de los animales analizados se han seleccionado 38 animales con diferentes títulos serológicos y 3 como controles negativos. Los animales se han sacrificado y uno de los perniles y los órganos diana (lengua y corazón) se han analizado en fresco para detectar al parásito en los tejidos porcinos. La presencia de T. gondii se ha evaluado mediante bioensayo en ratón y por qPCR, obteniéndose valores del 73,7 %. La viabilidad del parásito en tejidos porcinos frescos se ha comprobado detectando DNA de T. gondii en los cerebros de los ratones seropositivos. El parásito era viable en el 42,1 % de los tejidos analizados.Con los resultados anteriores se ha comprobado que existe una relación estadísticamente significativa entre el título serológico del cerdo y la detección del parásito en sus tejidos. Se ha observado una mayor presencia del parásito en los tejidos de cerdos con títulos serológicos iguales o mayores a 1:80.Asimismo, también se ha realizado un estudio estadístico para comparar los resultados obtenidos en cada uno de los tejidos porcinos (pernil y órganos diana). Se ha llegado a la conclusión que no hay diferencias entre los valores observados de presencia y viabilidad del parásito entre ambos tejidos. La constatación de que no existen diferencias significativas en estos resultados, existiendo concordancia entre ambas muestras, nos permite proponer como herramienta de control de materia prima la selección y análisis de órganos diana, de menor valor comercial que los perniles.El pernil homólogo de cada uno de los cerdos se ha sometido al proceso de curación, dividiéndose en dos tiempos de curado (9 y 12 meses). Tras el procesado se ha realizado un estudio para evaluar la presencia y viabilidad de T. gondii en los jamones y así comprobar la eficacia del curado en la supervivencia del parásito. Se ha observado que este tratamiento tiene eficacia contra T. gondii pero no lo destruye totalmente, ya que se ha detectado presencia del parásito en 11 jamones y viabilidad en 4 de los mismos. Asimismo, se ha determinado que el tiempo de curado de 12 meses tiene mayor efecto frente al parásito que el tratamiento de 9 meses.Por último, otro de los hitos que se han conseguido en este trabajo ha sido el estudio de los factores fisicoquímicos de los jamones para evaluar su influencia en la presencia y viabilidad del parásito en el producto final. Se ha determinado una relación estadística entre la concentración de grasa del jamón curado y la viabilidad del parásito.Con los resultados obtenidos, se han propuesto medidas de gestión del riesgo de T. gondii en la industria de elaboración de jamón curado, como la aplicación de Buenas Prácticas de Higiene en granjas, la selección de cerdos seronegativos o con titulaciones que impliquen una baja probabilidad de encontrar el parásito en su carne, la realización del control de T. gondii en órganos diana con un menor valor comercial o el aumento del tiempo de curado del jamón.<br /

Toxoplasma gondii en carne de ganado ovino

La toxoplasmosis es una enfermedad de carácter zoonótico provocada por Toxoplasma gondii, un parásito intracelular con una amplia distribución mundial pues, se estima que un 25-30% de la población humana es seropositiva. Puede diseminarse rápidamente por el organismo alcanzando lugares donde la respuesta inmune es limitada, como es el tejido nervioso, muscular y cardíaco, provocando lesiones como coriorretinitis o meningoencefalitis, además de posibles desórdenes como la esquizofrenia o el trastorno bipolar. A su vez, es capaz de transmitirse de madre a hijo y puede generar abortos durante el embarazo o lesiones importantes en los fetos.En el presente Trabajo de Fin de Grado se realiza una revisión bibliográfica de T. gondii y la toxoplasmosis, haciendo hincapié en la presencia de T. gondii en carne de ganado ovino. Con el fin de conocer la prevalencia en carne de esta especie en España, se han analizado 56 muestras de tejido muscular y se ha empleado la técnica qPCR para determinar la presencia de ADN del parásito. El 21’4% de las muestras analizadas estaban parasitadas, lo que demuestra que el consumo de carne contaminada puede suponer un riesgo para la salud.<br /

Determinación de la prevalencia de toxoplasma gondii mediante test de microelisa en gatos domésticos, propietarios y personal de la Clínica Veterinaria Planeta Vida

This research aims to determine the prevalence of Toxoplasma gondii by microELISA test in domestic cats, owners and staff of Planeta Vida Veterinary Clinic for correlation of positive cases. Blood samples were collected by venipuncture, draw 2-3 cc, it is passed in vacutainer tubes steeping, we centrifuged for 10 minutes at 1500 rpm separating the cells from plasma or serum, then take 1-3 drops to put in the chamber of adding Test 1 drop of buffer and waited 5-10 minutes for reading. Getting in the investigation of all domestic cats (20 cats) was negative 75% and 25% presented a reaction to IgG; of all owners (20 owners), it was found that 80% were negative for IgG and 20% presented a chronic infection. Additionally the total staff (10 people) it was found that 30% tested positive for IgG and 70% were negative; in 100% three groups tested negative acute infection (IgM). Demostrating that there is no direct correlation between domestic cats and their owners, showing positive cats are not transmitted the disease to their owners.Esta investigación tuvo por objetivo determinar la prevalencia de Toxoplasma gondii mediante test de microElisa en gatos domésticos, propietarios y personal de la Clínica Veterinaria Planeta Vida para establecer una correlación de los casos positivos. Se recolectaron muestras sanguíneas por venopunción, extraemos 2-3 cc, pasamos en tubos vacutainer dejando reposar, centrifugamos durante 10 minutos a 1500 rpm separando las células del plasma o del suero, luego tomamos 1-3 gotas que colocamos en la cámara del Test añadiendo 1 gota de buffer y esperamos 5-10 minutos para realizar la lectura. Obteniendo en la investigación que del total de gatos domésticos (20 gatos) el 75 % dio negativo y el 25 % presento una reacción a IgG; del total de los propietarios (20 propietarios), se obtuvo que el 80 % fuera negativo a IgG y el 20 % presento una infección crónica. Adicionalmente del total del personal (10 personas) se obtuvo que el 30% dio positivo a IgG y el 70% restante fue negativo; en los tres grupos el 100% dio negativo a una infección aguda (IgM). Demostrando que no existe una correlación directa entre los gatos domésticos y sus propietarios, observándose los gatos positivos no trasmitieron la enfermedad a sus dueños

Optimización de ensayos de ELISA indirecto y Dot Blot para la detección de anticuerpos anti- Toxoplasma gondii en felinos (Felis catus domesticus) con las proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7

La Toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria causada por Toxoplasma gondii, cuyo hospedador definitivo es el gato doméstico, por lo general la infección tiene un curso sin manifestaciones clínicas, aunque en algunos casos puede producir trastornos digestivos, neuronales y reproductivos. La infección por T. gondii se puede adquirir mediante el consumo de agua o alimentos contaminados con oocistos eliminados por felinos domésticos a través de las heces, por ello es importante su diagnóstico, ya que, en el gato el parásito se reproduce de manera sexual, permitiendo así una mayor diversidad de genes en el T. gondii y en sus próximas generaciones. Varios estudios sugieren alternativas diagnósticas prometedoras para identificar anticuerpos anti-T. gondii en gatos con el uso de proteínas recombinantes en ensayos como ELISA indirecto y Dot Blot, en esta investigación se logró optimizar ambos ensayos para detectar anticuerpos anti-T. gondii en muestras serológicas de gatos domésticos, utilizando proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7 de T. gondii. Se obtuvieron resultados favorables en el ELISA indirecto utilizando como protocolo a la combinación de antígeno al TgSAG2, placa Multisorp, bloqueo BSA, diluyente leche descremada y como sustrato ABTS. Para el protocolo de Dot Blot la mejor combinación fue con el antígeno TgSAG2, membrana PVDF, sustrato DAB, dilución en solución de BSA y bloqueo con BSA. En cuanto al tipo de ensayo no se observaron diferencias significativas (p ≤ 0,05) entre el ensayo ELISA y Dot Blot, demostrando que ambos son idóneos para diagnosticar infección por T. gondii en corto tiempo y a costos reducidos.Toxoplasmosis is caused by the single-celled parasite Toxoplasma gondii, whose definitive hosts are domestic cats. This infection tends to show some clinical symptoms. In some cases, it might produces some digestive, neuronal, and reproductive disorders. T. gondii infection might be acquired through contaminated water or food containing oocysts, therefore, its diagnosis is important, since in the cat the parasite reproduces sexually, thus allowing a greater diversity of genes in T. gondii and in its next generations. Several studies suggest promising alternatives to identify T gondii antigens in cats using recombinant proteins in tests like indirect ELISA and Dot Blot, this research reaches to optimize that tests to detect antibodies anti-T. gondii. In our serologic samples from domestic cats, using recombinant proteins TgSAG2 and TgSAG7 from T gondii. It obtained great results,the results in indirect ELISA using as the protocol of the combination of the antigen TgSAG2Multisorp plaque, BSA, and as substrate ABTS. For the protocol of Dot Blot, the best combination was with the antigen TgSAG2 membrane PVDF. Substrate DAB and dilution in BSA and blocking with BSA. With respect to the test there were no significant differences between the test of indirect ELISA, and Dot Blot, showing that both methods are suitable for the diagnosis of infection by T gondii in a short period of time and with a minimum amount of money.0000-0001-9141-017

Seroprevalencia de Neospora SPP en Vacas en Producción en el Sector de Cayma La Tomilla. Arequipa 2012

Debido a que la actividad ganadera en la zona de estudio, representa una de las fuentes principales de ingreso económico para los productores de la zona, es probable que mediante la determinación de la seroprevalencia de Neospora caninum, los productores puedan implementar una serie de medidas de control de la enfermedad, las cuales evitarán los efectos negativos del parásito en su hato así como también evitarán la transmisión del mismo en el centro de producción. En el Perú, estudios realizados en el ganado bovino registran la presencia de Neospora caninum con prevalencias que varían entre el 30 al 57% en las cuencas lecheras de Lima y Arequipa (Andresen, 1999; Silva et al., 2002). La mayoría de estas investigaciones se han realizado en explotaciones lecheras de tipo intensivo; sin embargo, en la zona de estudio, donde la crianza de ganado es de tipo intensivo, extensivo o mixta, no existe un estudio que indique la seroprevalencia de este parasito. Por lo tanto, se diseñó el presente estudio para determinar la seroprevalencia de Neospora canimun en bovinos en el sector de Cayma La Tomilla, mediante la detección de anticuerpos séricos utilizando la técnica de ELISA directa, a fin de aportar información para futuros estudios epidemiológicos relacionados a este parásito. Con el objetivo de determinar la seroprevalencia de Neospora caninum, en el sector La tomilla, distrito de Cayma, Provincia y Departamento de Arequipa, se tomó una muestra aleatoria de 114 animales hembras en producción de un total de 232 animales. Las muestras serológicas se analizaron en el laboratorio de LABVETSUR- Arequipa mediante la prueba de ELISA indirecto, en la que un anticuerpo primario se lleva a cabo en las paredes de una placa de microtitulación. Cuando la muestra se sospecha que contiene el antígeno que se añade, hay una reacción antígeno-anticuerpo. A continuación, un anticuerpo secundario ligado a una enzima que es capaz de reaccionar con el antígeno se añade. Si el antígeno está presente en la muestra, se une a este anticuerpo ligado a enzimas. Cuando un sustrato incoloro se agrega, un color se desarrolla, indica la presencia de antígeno. Realizada la prueba de ELISA indirecto se determinó una seroprevalencia de 42% a Neospora caninum, en los vacunos bajo estudio.Tesi